PEMERIKSAAN KIMIA AIR, MAKANAN, DAN MINUMAN

KESADAHAN JUMLAH

Metode              : Kompleksometri

Prinsip                : Kadar total CaCO₃ ditentukan dengan cara titrasi langsung dengan larutan standar EDTA pada pH 10 dengan menggunakan indikator EBT. Agar pH mencapai ±10 maka ditambah buffer pH 10.

Reaksi                :               - Ca ⁺⁺ + EBT                                   à Ca- EBT

                                     Ca- EBT + EDTA       à Ca- EDTA

-  Mg ⁺⁺ + EBT                              à Mg- EBT

Mg- EBT + EDTA                      à Mg- EDTA + EBT

Reagensia        : - Larutan standar EDTA 0,01 M

-   Buffer pH 10

-   Indikator EBT 1 % (serbuk )

Prosedur           : - Dipipet sampel 50,0 ml, dimasukkan dalam erlenmeyer

-  Ditambah 2 ml larutan buffer pH 10

-   Ditambah indikator EBT 1% secukupnya

-   Dititrasi dengan larutan standar EDTA 0,01 M

-   Titik akhir titrasi dicapai dari warna merah menjadi biru muda

Perhitungan   : ml titrasi x M.EDTA x BM CaCO₃ x 1000

                                                                ml sampel

                                = ...................... ppm CaCO₃

                                BM CaCO₃ = 100

ALKALINITAS

Metode                 : Acidimetri

Prinsip                   : Penetralan asam-basa

Reaksi                    : HCO₃- + 2HCl à 2Cl + H₂CO₃

                                                                               

Reagensia           :  - HCl 0,1 N

-   Indikator MO 0,1 %

Prosedur              :  - Dipipet sampel 50,0 ml, masukkan dalam erlenmeyer

-   Ditambah indikator MO 0,1 % sebanyak 3 tetes

-   Titrasi dengan larutan standar HCl 0,1 N dari warna kuning menjadi merah orange

Perhitungan      : ml titrasi x N.HCl x 6,1 x 1000

                                                            0,1                 ml.sampel

                                   = ...................... ppm

ACIDITAS

Metode                 : Alkalimetri

Prinsip                  : Penetralan asam-basa

Reaksi                    : CO₂ + 2NaOH  à Na₂CO₃ + H₂O

Reagensia           :  - NaOH 0,1 N

-   Indikator PP 1 %

Prosedur              :  - Dipipet sampel 50,0 ml, masukkan dalam erlenmeyer

-   Ditambah indikator PP 1 % sebanyak 3 tetes

-   Titrasi dengan larutan standar NaOH 0,1 N dari tidak berwarna menjadi merah muda (konstan)

Perhitungan      : ml titrasi x N.NaOH x 4,4 x 1000

                                                                 0,1                    ml.sampel

                                   = ...................... ppm

PK CHLORIDA  (Cl^-) DALAM AIR

Metode                 : Argentometri Cara Mohr

Prinsip                  : - Dalam suasana netral atau sedikit basa, ion chlorida diendapkan menjadi perak chlorida (AgCl).

                                     - Kelebihan perak nitat (AgNO₃) akan bereaksi dengan kalium kromat (K₂CrO₄) membentuk warna merah bata.

Reaksi                    : Ag+ + Cl-                                      à ↓AgCl putih

                                     2AgNO₃ + K₂CrO₄                    à ↓Ag₂CrO₄ + 2KNO₃ merah bata

Reagensia           :  -  AgNO₃ 0,1N

-   Indikator K₂CrO₄ 5%

-   HNO₃ 10%

-   Serbuk MgO

Prosedur              :  - Dipipet sampel 50,0 ml, masukkan dalam erlenmeyer

                                      -  Dicek pH, apabila asam ditambah dengan MgO , sedangkan bila basa ditambah dengan HNO₃ 10%, dicek kembali sampai pH netral.

                                      - Ditambahkan 3 tetes indikator K₂CrO₄ 5 %

                                      -  Titrasi dengan larutan standar AgNO₃ 0,1N dari waran kuning menjadi endapan merah bata

Perhitungan      : ml titrasi x N AgNO₃ x BA Cl ^–x 1000

                                                                ml. sampel

                                     = ...................... ppm

PK CHLORIDA  (Cl^-) DALAM AIR

Metode                 : Argentometri Cara Mohr

Prinsip                  : - Dalam suasana netral atau sedikit basa, ion chlorida diendapkan menjadi perak chlorida (AgCl).

                                     - Kelebihan perak nitat (AgNO₃) akan bereaksi dengan kalium kromat (K₂CrO₄) membentuk warna merah bata.

Reaksi                    : Ag+ + Cl-                                      à ↓AgCl putih

                                     2AgNO₃ + K₂CrO₄                    à ↓Ag₂CrO₄ + 2KNO₃ merah bata

Reagensia           :  -  AgNO₃ 0,1N

-   Indikator K₂CrO₄ 5%

-   HNO₃ 10%

-   Serbuk MgO

Prosedur              :  - Dipipet sampel 50,0 ml, masukkan dalam erlenmeyer

                                      -  Dicek pH, apabila asam ditambah dengan MgO , sedangkan bila basa ditambah dengan HNO₃ 10%, dicek kembali sampai pH netral.

                                      - Ditambahkan 3 tetes indikator K₂CrO₄ 5 %

                                      -  Titrasi dengan larutan standar AgNO₃ 0,1N dari waran kuning menjadi endapan merah bata

Perhitungan      : ml titrasi x N AgNO₃ x BA Cl ^–x 1000

                                                                ml. sampel

                                     = ...................... ppm

DO DALAM AIR

Metode                 : Iodometri

Prinsip                  : - Penambahan larutan Mn²⁺ kedalam sampel dalam suasana basa kuat dengan adanya oksigen terlarut akan mengoksidasi dengan cepat sejumlah ekuivalen Mn(OH)₂ yang telah terdispersi menjadi Mn(OH)₂ dengan valensi tinggi. Adanya ion I^- akan mengoksidasi MnO₂ menjadi Mn(OH)₂ yang bervalensi II. Kelebihan I₂ dititrasi dengan Na₂S₂O₃.

Reaksi                    : MnSO₄ + 2NaOH + 2O₂         à MnO₂ + Na₂SO₄ + 2H₂O

                                     MnO₂ + 2KI + 2H₂O                 à Mn(OH)₂ + I₂ + 2KOH

                                     I₂ + Na₂S₂O₃                                à Na₂S₄O₆ + 2NaI

Reagensia           :  -  Na₂S₂O₃ 0,01N

-    Larutan MnSO₄ 20%

-   H₂SO₄ (p)

-   Amylum 1%

-   Pereaksi O₂

Prosedur              :  - Disiapkan erlenmeyer tutup asah yang sudah diketahui volumenya.

                                      -Dimasukkan sampel ke dalam erlenmeyer yang sudah diketahui volumenya sampai penuh, kemudian tutup, dibuang cairan yang ada diluar tutupnya.

                                      - Ditambah 2 ml MnSO₄ 10%, diaduk dengan batang pengaduk

                                      - Ditambah 3 ml reagen pereaksi O₂, diaduk dengan batang pengaduk

                                      - Ditutup kemudian didiamkan selama 10 menit dalam ruang gelap

                                      - Endapan yang terbentuk dilarutkan dengan 5 ml H₂SO₄ (p)

                                      - Dituang semua larutan dari erlenmeyer tutup asah kedalam erlenmeyer tutup asah yang lebih besar

                                      - Titrasi dengan larutan standar Na₂S₂O₃ 0,01N sampai warna kuning jerami

                                      - Ditambah 1 ml amylum 1%, dititrasi kembali dengan Na₂S₂O₃ sampai warna biru hilang

Perhitungan      : ml titrasi x N Na₂S₂O₃ x 8 x 1000

                                                     ml. sampel – 5

                                   = ...................... ppm 

PK ZAT ORGANIK (ANGKA PERMANGANAT)

Metode                 : Permanganometri

Prinsip                  : Zat organik dalam air dioksidasi dengan larutan KMnO₄, sisa KmnO₄ direduksi dengan H₂C₂O₄ berlebihan, kelebihan H₂C₂O₄ dititrasi dengan larutan standar KMnO₄

Reaksi                    : 2KMnO₄ + 3H₂SO₄ à 2MnSO₄ + 3H₂O + 5On + K₂SO₄

Reagensia           :  - H₂SO₄  4N (bebas zat organik)

-    H₂C₂O₄ 0,01N

-   KMnO₄ 0,01N

Prosedur              : 

                                      - Erlenmayer yang akan dipakai dicuci dulu dengan cara :

·      Masukkan 25 ml aquadest tambah beberapa tetes KMnO₄ 0,01 N sampai warna merah jambu

·      Tambah 5 ml H₂SO₄ 4N panaskan 5 menit

·      Cairan dibuang

                                      - Pipet 25,0 ml sampel masukkan dalam erlenmayer

                                      - Tambah 5 ml H₂SO₄ 4N dan batu didih + 15 ml KMnO₄

                                      - Dipanaskan sampai mendidih, pertahankan selama 10 menit

                                      - Tambah 15,0 ml H₂C₂O₄ 0,01N

                                      - Jika sudah tidak berwarna langsung dititrasi dengan larutan KMnO₄ 0,01N

                                     sampai warna merah muda / pink

Perhitungan   : [(15+A) x N KMnO₄ – ( 15 x N H₂C₂O₄ )] x 0,316 x 1000

                                                                                                                                N~          B           

                                   = ………. mg/ l

                               

                                   A = ml titran KMnO₄

                                   B = ml sampel

                                   1 ml KMnO₄ 0,01N ~ 0,316 mg

PENETAPAN KADAR NITRIT (NO₂)

Metode                 : Spektrofotometri

Prinsip                  : Konsentrasi nitrit ditentukan oleh terbentuknnya warna kemerahan setelah ditambah dengan Gries Romyes. Warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer pada λ 520 nm.

Reagensia           :  -  Gries Romyes

-    Larutan standar Nitrit 10 ppm

Prosedur              :  - Disiapkan labu takar 50,0 ml sebanyak 8 buah.

-   Dimasukkan masing-masing ke dalam labu takar dengan :

a)   Blanko    : aquadest sebanyak 50,0 ml

b)  Sampel   : larutan sampel sebanyak 50,0 ml

c)   Standar  : 5 buah labu takar masing-masing diisi dengan larutan standar NO₂ secara bertingkat, misal:

V1 x ppm1 = V2 x ppm 2

Standar 1: 50,0 ml x 0,1 ppm  = …ml x 10 ppm

                                                                50,0 ml x 0,1 ppm  =  0,5 ml lar. Standar NO₂ 10 ppm

                                                                       10 ppm

                                            Standar 2: 50,0 ml x 0,2 ppm  = ...ml x 10 ppm

                                                               50,0 ml x 0,2 ppm  = 1,0 ml lar.standar NO₂ 10 ppm

                                                                       10 ppm

-   Diteruskan sampai 5 standar dengan rumus perhitungan seperti diatas.

-   Pada labu takar standar, setelah pemberian larutan standar 0,1 – 0,5 ppm lalu ditambah dengan aquadest sampai 50,0 ml

- Ditambah 300 mg serbuk Gries Romyes pada masing-masing labu takar, dihomogenkan

-   Dibiarkan selama 30 menit

-   Dibaca absorbance NO₂ dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 520 nm

Perhitungan      :   c. sampel = abs.sampel    x  c. standar

                                                                abs.standar

PENETAPAN KADAR AMONIA (NH₃)

Metode                 : Spektrofotometri

Prinsip                  : Konsentrasi NH₃ ditentukan oleh terbentuknya larutan koloid kuning oranye coklat dengan penambahan reagen Nessler. Warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer pada λ 420 nm.

Reaksi                    : -

Reagensia           :  -  Reagen Nessler

-    Larutan K-Na. tartrat 3%

-    Larutan standar NH₃ 100 ppm

Prosedur              :  - Disiapkan labu takar 50,0 ml sebanyak 8 buah.

-   Dimasukkan masing-masing ke dalam labu takar dengan :

a)   Blanko    : aquadest sebanyak ±25,0 ml

b)  Sampel   : larutan sampel sebanyak ±25,0 ml

c)   Standar  : 5 buah labu takar masing-masing diisi dengan larutan standar NH₃ secara bertingkat, misal:

V1 x ppm1 = V2 x ppm 2

Standar 1: 50,0 ml x 1 ppm  = …ml x 100 ppm

                                                                   50,0 ml x 1 ppm  =  0,5 ml lar. Standar NH₃ 100 ppm

                                                                        100 ppm

                                            Standar 2: 50,0 ml x 2 ppm  = ...ml x 10 ppm

                                                                  50,0 ml x 2 ppm  = 1,0 ml lar.standar NH₃ 10 ppm

                                                                        100 ppm

-   Diteruskan sampai 5 standar dengan rumus perhitungan seperti diatas.

-   Pada labu takar standar, setelah pemberian larutan standar 1 – 5 ppm lalu ditambah dengan aquadest sampai ±25,0 ml

- Ditambah 5 ml lar. K-Na tartrat 3%  pada masing-masing labu takar, dihomogenkan

-   Ditambah 5 ml reagen Nessler, dihomogenkan

-   Dibiarkan selama 15 menit

-   Dibaca absorbance NH₃dengan spektrofotometer pada panjang gelombang  420nm

Perhitungan      :   c. sampel = abs.sampel    x  c. standar

                                                                abs.standar

PENETAPAN KADAR CUPRUM (Cu)

Metode                 : Spektrofotometri

Prinsip                  : Cu dalam air bereaksi dengan diethylditiocarbamat membentuk Cu-diethylditiocarbamat yang berwarna kuning. Warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer pada λ 480 nm.

Reagensia           :  -  Reagen Na-diethylditiocarbamat 1%

-    NH₄OH (p)

-    Larutan standar Cu100 ppm

Prosedur              :  - Disiapkan labu takar 50,0 ml sebanyak 8 buah.

-   Dimasukkan masing-masing ke dalam labu takar dengan :

a)     Blanko   : aquadest sebanyak ±25,0 ml

b)     Sampel  : larutan sampel sebanyak ±25,0 ml

c)      Standar                : 5 buah labu takar masing-masing diisi dengan larutan standar Cu secara bertingkat, misal:

V1 x ppm1 = V2 x ppm 2

Standar 1: 50,0 ml x 1 ppm  = …ml x 100 ppm

                                                                50,0 ml x 1 ppm  =  0,5 ml lar. Standar Cu 100 ppm

                                                                       100 ppm

                                            Standar 2: 50,0 ml x 2 ppm  = ...ml x 10 ppm

                                                               50,0 ml x 2 ppm  = 1,0 ml lar.standar Cu 10 ppm

                                                                       100 ppm

-   Diteruskan sampai 5 standar dengan rumus perhitungan seperti diatas.

-   Pada labu takar standar, setelah pemberian larutan standar 1 – 5 ppm lalu ditambah dengan aquadest sampai ±25,0 ml

-   Ditambah 0,2 ml NH₄OH  pada masing-masing labu takar, dihomogenkan

-   Ditambah 0,2 ml Na-diethylditiocarbamat, dihomogenkan

-   Dibiarkan selama 5 menit

-   Dibaca absorbance Cu dengan spektrofotometer pada panjang gelombang

480 nm

Perhitungan      :   c. sampel = abs.sampel    x  c. standar

                                                                abs.standar

PENETAPAN KADAR BESI (FENANTROLIN)

Metode                 : Spektrofotometri

Prinsip                  : Besi direduksi dalam suasana asam dan hidroksilamin ferro yang terjadi dengan penambahan orthofenantrilia pada pH 3,2 – 3,3, membuat ion kompleks yang berwarna jingga. Warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer pada λ 510 nm.

Reaksi                    : -

Reagensia           : -  Larutan hidroksilamin 10%

-    Larutan fenantrolin

-    HCl (p)

-    Buffer acetat

-    Larutan standar Fe100 ppm

Prosedur              :  - Disiapkan labu takar 100,0 ml sebanyak 8 buah.

-   Dimasukkan masing-masing ke dalam labu takar dengan :

a)   Blanko    : aquadest sebanyak ±50,0 ml

b)  Sampel   : larutan sampel sebanyak ±50,0 ml

c)   Standar  : 5 buah labu takar masing-masing diisi dengan larutan standar Fe secara bertingkat, misal:

V1 x ppm1 = V2 x ppm 2

Standar 1: 50,0 ml x 1 ppm  = …ml x 100 ppm

                                                                   50,0 ml x 1 ppm  =  0,5 ml lar. Standar Fe 100 ppm

                                                                         100 ppm

                                            Standar 2: 50,0 ml x 2 ppm  = ...ml x 10 ppm

                                                                   50,0 ml x 2 ppm  = 1,0 ml lar.standar Fe 10 ppm

                                                                         100 ppm

-   Diteruskan sampai 5 standar dengan rumus perhitungan seperti diatas.

-   Pada labu takar standar, setelah pemberian larutan standar 1 – 5 ppm lalu ditambah dengan aquadest sampai ±50,0 ml

-   Ditambah 3 tetes HCl (p) pada masing-masing labu takar, dihomogenkan

-   Ditambah 1 ml hidroksilamin, dihomogenkan

-   Dididihkan selama 15 menit dalam waterbath lalu didinginkan.

-   Ditambah 2 ml buffer acetat, dihomogenkan

-   Ditambah 2 ml larutan fenantrolin, dihomogenkan

-   Masing-masing labu takar ditambah aquadest add 100 ml, dihomogenkan lalu dibiarkan selama 10 menit.

-   Dibaca absorbance Fe dengan spektrofotometer pada panjang gelombang

510 nm

Perhitungan      :   c. sampel = abs.sampel    x  c. standar

                                                                abs.standar

PENETAPAN KADAR CUKA (CH₃COO^-)

Metode                 : Alkalimetri

Bahan                    : Cuka makan

Prinsip                  : Penetralan asam-basa

Reaksi                    : CH₃COOH + 2NaOH à CH₃COONa + H₂O

Reagensia           :  - NaOH 0,1 N

-   Indikator PP 1 %

Prosedur              :  - Dipipet sampel 10,0 ml, masukkan dalam erlenmeyer

-   Ditambah indikator PP 1 %

-   Titrasi dengan larutan standar NaOH 0,1 N dari tidak berwarna menjadi merah muda (konstan)

Perhitungan      : ml titrasi x N.NaOH x BE CH₃COOH x 100%

                                                                ml.sampel x 1000

                                   = ...................... %

                                   BE = BM à 60,05

PENETAPAN KADAR AIR SECARA LANGSUNG

Metode                 : Deanstark

Bahan                    : Madu, Keju, Buah-buahan

Prinsip                 : Sampel yang dipanaskan xylol, menyebabkan uap-uap xylol membawa air menuju tabung pendingin, terjadi kondensasi yang masuk dalam tabung pengukur air (air+xylol), dimana akan terjadi 2 lapisan.

      Xylol               : terletak diatas air yang kan kembali ke labu pemanas bila permukaannya   maksimal

                                      Air                    : terletak dibawah, dapat dilihat dan diukur volumenya.

Reaksi                    : -

Reagensia           : Xylol

Prosedur              : - Ditimbang dengan seksama ±3,5 – 10 gram sampel (menyesuaikan sampel yang digunakan) yang telah dibersihkan.

                -   Dimasukkan dalam labu coldestilasi

                -   Ditambah 100 ml xylol dan alat coldestilasi segera dirangkai.

-   Dipanaskan dengan api kecil sampai uap keluar, selanjutnya api dibesarkan.

                 -   Diamati penambahan volume air dalam tabung penampung.

-   Api dimatikan jika air dalam tabung penampung sudah tidak bertambah lagi.

-   Dibersihkan bagian dinding dalam perangkat coldestilasi (bagian kondensor sampai tabung penampung) dengan lidi kapas yang dibasahi xylol

-   Dibaca tinggi lapisan air pada skala.

Perhitungan      : ml pembacaan skala x 100%

                                                gram sampel

                                   = ...................... %

IDENTIFIKASI BORAKS

Metode              : Reaksi Nyala

Bahan                 : Bakso, Bleng, Sosis, Cilok

Prinsip                                :Boraks dalam makanan diubah menjadi boron kemudian

                                 direaksikandenganH2SO4, terbentuk nyala api warna hijau.

Reagensia        : - Ca(OH)2

                                   - H2SO4

                                  - Methanol absolut

Cara Kerja        :

-          Ditmbang ± 10 gram sampel dimasukkan dalam cawan porselin

-          Ditambah beberapa tetes Ca(OH)₂ lalu digosongkan

-          Ditambah 1 ml H₂SO₄ dan 5 ml methanol absolut

-          Dihomogenkan lalu dibakar

-          Dilakukan pembakaran dengan cara yang sama pada Na Borak sebagai baku pembanding

Pengamatan   : Positif : bila terbentuk nyala warna hijau seperti pada baku.

IDENTIFIKASI BORAKS

Metode              : Reaksi warna dengan kertas Curcumin

Bahan                 : Bakso, Bleng, Cilok, Sosis

Prinsip                : Pembentukan senyawa komplek berwarna merah terang dari Rososianin yang

                                berasal dari senyawa Boron dengan Curcumuin dalam suasana asam.

Reagensia        : -  HCl 7 %

-   Kertas Curcumin

Prosedur           :

-   Ditimbang sampel + 10 gram

-   Direndam sampel dalam aquadest selama 30 menit

-   Diambil 1 ml larutan dari rendaman tadi, dimasukkan dalam tabung reaksi

-   Ditambahkan 10 – 20 tetes HCl 7 %

-   Dicelupkan kertas curcumin lalu ditiriskan

-   Lakukan percobaan yang sama terhadap larutan Na Borak sebagai baku

   Pembanding

Pengamatan   : positif : bila terbentuk bercak warna merah terang seperti pada baku.

IDENTIFIKASI FORMALIN

Metode              : Reaksi warna dengan asam kromatopat

                                ( cara destilasi )

Bahan                 : Ikan asin, Susu, Ikan segar, Tahu, Cumi kering, Mie basah

Prinsip                : Dengan pemanasan dalam penangas air yang mendidih, formaldehid bereaksi

                                dengan asam kromatopat membentuk senyawa berwarna ungu

Prosedur           :

-  Diukur 100 ml sampel, ditambah 100 ml aquadest dimasukkan kedalam labudestilasi

-   Ditambah 1 ml asam phosphat dan dihubungkan dengan perangkat destilasi

-   Didestilasi hingga diperoleh hasil destilasi sebanyak 50 ml

-  Dimasukkan 5 ml larutan asam kromatopat + 1 ml destilat ke dalam tabung alkali

-   Dipanaskan dalam waterbath selama 15 menit

-   Gunakan larutan formalin sebagai baku pembanding

-   Gunakan aquadest sebagai blanko

Pengamatan   : Positif : bila terbentuk larutan warna ungu seperti pada baku

IDENTIFIKASI FORMALIN

Metode              : Reaksi warna dengan asam kromatopat

                                ( cara uji cepat )

Bahan                 : Ikan asin, Susu, Ikan segar, Tahu, Cumi kering, Mie basah

Prinsip                : Dengan pemanasan dalam penangas air yang mendidih, formaldehid bereaksi

                                dengan asam kromatopat membentuk senyawa berwarna ungu

Prosedur           :

-   Ditimbang sampel + 50 gram

-   Direndam dengan aquadest selama 30 menit

-   Dimasukkan 1 larutan rendaman ke dalam tabung alkali

-   Ditambah 5 ml asam kromatopat

-   Dipanaskan dalam waterbath selama 15 menit

-   Gunakan larutan formalin sebagai baku pembanding

-   Gunakan aquadest sebagai blanko

Pengamatan   : Positif : bila terbentuk larutan warna ungu seperti pada baku

IDENTIFIKASI METHANYL YELLOW

Metode                 : Reaksi Warna dengan HCl

Bahan                    : Saos, Minuman kemasan

Prinsip                   : Methanyl yellow dalam sampel direaksikan dengan HCl 4 N akan terbentuk warna violet

Reagensia           : HCl 4 N

                                      Baku methanyl yellow

Prosedur              :

-   Direndam sampel dengan aquadest selama 30 menit

-   Dimasukkan 1 ml larutan rendaman ke dalam tabung reaksi

-   Ditambahkan 5 tetes HCl 4 N ke dalam tabung

-   Dilakukan tes yang sama terhadap baku methanyl yellow sebagai

Baku pembanding

-   Dilakukan tes yang sama terhadap aquadest sebagai blanko

Pengamatan     : Positif : Bila terbentuk larutan warna violet seperti pada baku methanyl yellow

IDENTIFIKASI PENGAWET BENZOAT

Metode                 : TLC ( Thin Layer Chromatography )

Bahan                    : Saos, Kecap

Prinsip                : Pengawet disari dengan diethyl eter, lalu dipisahkan secara TLC. Bercak pengawet benzoat dapat dilihat pada sinar UV 254 nm.

Reagensia           :-   Eluen

                                   -   Diethy eter

                                   -   Buffer pH 4

                                  -   NaCl jenuh

Prosedur              :-   Dimasukkan 50 ml sampal ke dalam corong pisah

                                    -   Ditambah 10 ml buffer pH 4 dan 25 ml diethyl eter

                                    -   Diekstraksi, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang

terpisah  (apabila terjadi emulsi, tambahkan 10 ml NaCl jenuh, kemudian ekstraksi kembali)

-   Ditampung cairan pada lapisan bagian atas dengan cawan poselin

-   Diuapkan cairan pada cawan hingga hampir kering

-   Ditotolkan cairan tersebut pada lempeng TLC

-   Dilakukan eluasi hingga eluen mencapai batas atas, kemudian keringkan

-   Diamati bercak yang terbentuk pada sinar UV (254 nm)

-   dibandingkan warnanya dan Rfnya dengan baku Benzoat

 Pengamatan      :  Positif : Bila terbentuk bercak berwarna ungu yang sama dan sejajar dengan baku Benzoat

IDENTIFIKASI PENGAWET SALYCILAT

Metode                 : Reaksi warna dengan FeCl₃

Bahan                    : Saos, Kecap

Prinsip                   : Pengawet disari dengan diethyl eter, lalu direaksikan dengan FeCl₃

Reagensia           :

-   Eluen

-   Diethy eter

-   Buffer pH 4

-   NaCl jenuh

Prosedur              :

-   Dimasukkan 50 ml sampal ke dalam corong pisah

-   Ditambah 10 ml buffer pH 4 dan 25 ml diethyl eter

-   Diekstraksi, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang

terpisah  (apabila terjadi emulsi, tambahkan 10 ml NaCl jenuh, kemudian ekstraksi kembali)

-   Ditampung cairan pada lapisan bagian atas dengan cawan poselin

-   Diuapkan cairan pada cawan hingga hampir kering

-   Ditambahkan 5 ml FeCl₃ 5% kemudian amati warna yang terjadi

-   Gunakan asam salicylat sebagai baku pembanding

Pengamatan      :  Positif : Bila terbentuk larutan warna ungu seperti pada baku

IDENTIFIKASI PEMANIS SAKARIN

Metode                 : TLC ( Tine Layer Chromatography )

Bahan                    : Minuman kemasan

Prinsip                   : Sakarin disari dengan ethyl acetat, lalu dipisahkan secara TLC. Bercak

                                     sakarinDilihat dengan sinar UV (254 nm)

Reagensia           :

-   Eluen                              - NaOH 50%

-   ether                              - campuran alkohol,NH₄OH,air

-   Ethyl acetat

-   H₂SO₄ 50 %

Prosedur              :

-   Dimasukkan 20 ml sampal ke dalam corong pisah

-   Ditambah 10 ml H2SO4 50% dan 25 ml ether

-   Diekstraksi, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang

terpisah 

-  Ditampung cairan pada lapisan bagian bawah, kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah lagi

-   Ditambahkan 5 ml NaOH 50%

-   Kemudian ditambahkan 25 ml ethyl acetat

-   Diekstraksi kembali, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang terpisah

-   Ditampung cairan pada lapisan bagian atas dalam cawan porselin.

-   Diuapkan cairan pada cawan hingga hampir kering

-   Ditotolkan cairan tersebut pada lempeng TLC

-   Dilakukan eluasi hingga eluen mencapai batas atas, kemudiandi keringkan

-   Diamati bercak yang terbentuk pada sinar UV (254 nm)

-   dibandingkan warnanya dan Rfnya dengan baku Sakarin

Pengamatan      :  Positif : Bila terbentuk bercak berwarna merah jambu seperti pada baku

                                      siklamat

IDENTIFIKASI PEMANIS SIKLAMAT

Metode                 : TLC ( Thin Layer Chromatography )

Bahan                    : Minuman kemasan

Prinsip                   : Siklamat disari dengan ethyl acetat, lalu dipisahkan secara TLC. Bercak

                                     siklamat bereaksi dengan gas brom dan flourecein membentuk senyawa

                                     berwarna merah jambu

Reagensia           :

-   Eluen                              - NaOH 50%

-   ether                              - campuran alkohol,NH₄OH,air

-   Ethyl acetat                               - gas brom dalam CCl₄

-   H₂SO₄ 50 %  - florescein dalam dimetil formamid

Prosedur              :

-   Dimasukkan 20 ml sampal ke dalam corong pisah

-   Ditambah 10 ml H₂SO₄ 50% dan 25 ml ether

-   Diekstraksi, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang

terpisah 

-  Ditampung cairan pada lapisan bagian bawah, kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah lagi

-   Ditambahkan 5 ml NaOH 50%

-   Kemudian ditambahkan 25 ml ethyl acetat

-   Diekstraksi kembali, kemudian didiamkan hingga terbentuk dua lapisan cairan yang terpisah

-   Ditampung cairan pada lapisan bagian atas dalam cawan porselin.

-   Diuapkan cairan pada cawan hingga hampir kering

-   Ditotolkan cairan tersebut pada lempeng TLC

-   Dilakukan eluasi hingga eluen mencapai batas atas, kemudiandi keringkan

-   Disemprot dengan gas brom lalu diamkan sampai bau brom hilang

-   Disemprot lagi dengan flourecein

-   Diamati bercak yang terjadi

Pengamatan      :  Positif : Bila terbentuk bercak berwarna ungu yang sama dan sejajar dengan

                                      baku Sakarin

IDENTIFIKASI RHODAMIN

Metode                 : Kromatografi kertas

Bahan                    : Lipstik, Kerupuk, Sempe, Sirup, Cendol, Kolang-kaling

Prinsip                   : Sampel diasamkan agar zat warna dapat terikat dalam benang wool yang selanjutnya dengan penambahan basa zat warna akan larut kembali untuk kemudian diperiksa secara kromatografi kertas.

Reagensia           :

-   Eluen                             

-   CH₃COOH 0,5 N                      

-   NH₄OH (p)                 

Prosedur              :

-  Dimasukkan eluen dalam chamber dan dibiarkan hingga permukaannya tenang (jangan digoyang-goyang) .

-   Dimasukkan 50 ml sampel ke dalam cawan porselen.

-   Ditambah 5 ml CH₃COOH 0,5 N.

-  Dimasukkan benang wool (panjang ± 2 cm)sampai seluruh permukaan benang tercelup dalam sampel.

-   Dipanaskan campuran tersebut hingga kental (jangan sampai kering).

-   Diambil benang yang sudah menyerap zat warna tadi dengan pinset.

- Dicuci dengan mencelupkan benang ke dalam aquadest sambil di goyang-goyang.

-   Dipindahkan benang ke cawan lain lalu di tambah 5 ml H₂SO₄ (p).

-  Dipanaskan campuran tersebut hingga kental (jangan sampai kering), dibuang benang wool.

-  Jika setelah pemanasan terbentuk warna hijau kotor / violet hitam, pemeriksaan dihentikan karena pewarna yang diunakan adalah pewarna alami.

-  Jika terbentuk warna yang lain, maka cairan kental tadi ditotolkan pada kertas kromatografi 5 – 10 totol, keringkan.

-   Dieluasi sampai eluen mencapai tanda batas, keringkan.

-   Diamati warna bercak yang terbentuk dibandingkan dengan baku.

-   Diamati fluorecensi di bawah sinar UV 254 nm.

Pengamatan   : Positif : Bila terbentuk bercak berwarna pink dan berfluorecein yang sama dan sejajar seperti pada baku rhodamin.

PENETAPAN KADAR BILANGAN ASAM

Metode                 : Alkalimetri

Bahan                    : Minyak goreng

Prinsip        : Bilangan asam dinyatakan sebagai banyaknya mg KOH yang dipakai untuk menetralkan asam-lemak bebas dalam 1 gram lemak / minyak.

Reagensia           :-   Alkohol 96 % netral                         -   Indikator PP 1 %                      -   KOH 0,05 N               

     

Prosedur              :

-  Ditimbang seksama 10,0 gr sampel

-   Dimasukkan ke dalam erlenmeyer.

  -   Ditambah 50 ml alcohol 96 % netral.

      -  Ditutup dengan kondensor, dipanaskan sampai mendidih.

  -   Dikocok kuat-kuat untuk melarutkan asam lemak bebasnya, dinginkan.

  -   Ditambah 3 tetes indicator PP 1 %.

     -   Dititrasi dengan KOH 0,05 N dari tidak berwarna sampai merah muda konstan

Perhitungan   : ml titrasi x N KOH x BM KOH           = ……. mg KOH

                                                gr sampel

PENETAPAN KADAR BILANGAN PEROKSIDA

 Metode                 : Iodometri

Bahan                    : Minyak goreng

Prinsip                   : Pengukuran sejumlah iod yang dibebaskan dari KI melalui oksidasi oleh peroksida dalam lemak pada suhu ruang dalam pelarut asam acetat dan kloroform.

Reagensia           :

-  Reagen campuran : 20 ml CH₃COOH + 20 ml alcohol 96 % + 55 ml CHCl₃          

-   KI kristal                     

-   Na₂S₂O₃ 0,01 N

-   Amylum 0,5 %          

     

Prosedur              :

-  Ditimbang seksama 5,0 gram sampel.

-   Dimasukkan ke dalam stop Erlenmeyer / iodine flask.

-   Ditambah 30 ml reagen campuran.

-  Ditambah 1 gram KI Kristal, segera ditutup.

-   Dibiarkan selama 30 menit ditempat gelap sambil sekali-kali digoyang.

-   Ditambah 50 ml aquadest.

-   Dititrasi dengan Na₂S₂O₃ sampai kuning muda.

-   Ditambah 1 ml amylum 0,5 %.

-   Titrasi dilanjutkan sampai warna biru hilang.

-   Dilakukan penetapan blanko.

ANGKA PENYABUNAN

Metode                 : Acidimetri

Bahan                    : Minyak goring

Tujuan                   : Menetapkan kadar bilangan penyabunan dalam mg KOH

Prinsip                   : Minyak / lemak disabunkan dengan larutan KOH ethanol ekses, kelebihan KOH dititrasi dengan HCl 0,5 N

Reagensia           :

-   HCl 0,5 N    

-   KOH ethanol 0,5 N                               

    (35-40 gr KOH dalam 20 ml aquadest + ethanol absolute ad 1000 ml)

-   Indikator PP 1 %                      

Prosedur              :

-  Ditimbang 2,0 gr sampel yang telah di homogenkan.

-   Dimasukkan ke dalam Erlenmeyer.

-   Ditambah 25,0 ml KOH ethanol, ditutup kondensor.

-  Ditambah 1 gram KI Kristal, segera ditutup.

-   Dipanaskan mendidih selama 10 menit.

-   Ditambah 1 ml indicator PP 1 %.

-   Dititrasi dengan HCl 0,5 N sampai tidak berwarna.

-   Dilakukan penetapan blanko 25,0 ml KOH ethanol.

Perhitungan   : (ml titrasi blanko – ml titrasi sampel) x N HCl x BM KOH            

                                                                                gr sampel

                                   = ……. mg KOH

PEMERIKSAAN GARAM BERYODIUM

( PENETAPAN KADAR KIO₃ )

Metode                 : Iodometri

Bahan                    : Garam dapur

Tujuan                   : Menetapkan kadar Kalium Iodat.

Prinsip                   : Kalium Iodat yang terkandung dalam sampel menguraikan KI dalam suasana asam, I₂ bebas yang terbentuk dititrasi dengan larutan standart Na₂S₂O₃ menggunakan indicator amylum.

Reaksi                    : KIO₃ + 2 Na₂S₂O₃ + 2 H₃PO₄ → 3 I₂ + K₃PO₄ + 3 H₂O

                                      I₂ + Na₂S₂O₃ → Na₂S₄O₆ + 2 NaI

Reagensia           :

-   Na₂S₂O₃ 0,05 N       

-   Amylum 1 %                               

-   KI 100 mg

-   Aquadest bebas CO₂

-   H₂SO₄ (p)                    

Prosedur              :

-  Ditimbang seksama 25,0 gr sampel.

-   Dimasukkan ke dalam Stop Erlenmeyer / Iodine flask melalui corong.

-   Dilarutkan dengan 125 ml aquadest bebas CO₂.

-  Ditambah 2-5 ml H₂SO₄ (p)

-   Ditambah 100 mg KI, segera ditutup.

-   Dititrasi dengan Na₂S₂O₃ 0,05 N sampai warna kuning muda.

-   Ditambah 1 ml amylum 1 %.

-   Titrasi dilanjutkan sampai warna biru tepat hilang.

-   Dilakukan titrasi blanko dengan NaCl.

Perhitungan   : 1 ml Na₂S₂O₃ 0,05 N setara 1,783 gr KIO₃  

                               (ml titrasi sampel – ml titrasi blanko) x N Na₂S₂O₃x 1,783 x 1000           

                                                                                0,05 x gr sampel

                                   = ……. ppm

PENETAPAN KADAR ETHANOL

(Dalam Minuman Beralkohol)

Metode                 : Penimbangan dengan Piqnometer

Bahan                    : Minuman beralkohol

Prinsip                   :-   Perbandingan berat alcohol dan berat aquadest didapatkan berat jenis.   Selanjutnya kadar alcohol dapat dihitung dalam table alcohol.

Reagensia           : Aquadest    

Prosedur              :

-  Dipipet seksama 100,0 ml sampel yang telah dihilangkan CO₂nya.

-   Ditambah 100,0 ml aqudest dan batu didih.

-  Didestilasi hingga hasil destilasi < 100,0 ml ditampung dalam labu takar yang direndam es.

-  Ditambah aquadest sampai tanda batas, tutup rapat.

-   Ditimbang piqnometer kosong (bersih dan kering) pada suhu 20°C.

-   Ditimbang piqnometer + aquadest pada suhu 20°C.

-   Ditimbang piqnometer + destilat pada suhu 20°C.

-   Dihitung kadar ethanol menggunakan table.

Perhitungan   :

                                   BJ ethanol = Berat destilat

                                                           Berat aquadest

                                   Hasil dilihat dalam table.

PENETAPAN KADAR GULA

Metode                 : Iodometri

 Prinsip                   :

-   Gula invert dalam sampel direaksikan dengan Luff Schoorl.

-   Kelebihan larutan Luff Schoorl dititrasi dengan larutan standar Na₂S₂O₃.

-   Kadar gula invert dalam sampel dihitung dengan menggunakan daftar kesetaraan.

-   Kadar sakarosa dihitung dari seslisih kadar gula setelah inversi.

Reaksi                    :          H   

                                          |          

                                     R - C - H + 2CuO   →    Cu₂O + R - COOH

                                                CuO + H₂SO₄     →     CuSO₄ + CO₂ + H₂SO₄

                                                CuSO₄ + 2KI      →    CuI₂ + I₂

                                                I₂ + Na₂S₂O₃      →    Na₂S₄O₆ + 2 NaI

Reagensia           :

-   H₂SO₄                             6 N

-   HCl                                   0,1 N & 4 N

-   NaOH                             0,1 N

-   Indikator MO            0,1 %

-   Na₂S₂O₃                         0,1 N

-   KI                                                      20 %

-   Amylum                        1 %

-   Luff Schoorl

-   Zn Asetat                    1,5 N

-   K₃Fe(CN)₆                   1 N

Prosedur              :

                                      Persiapan Sampel

1.       Sirup

Ditimbang 1,0 gr sampel, dimasukkan dalam labu takar 500 ml di tambah aquadest sampai tanda batas, disaring.

2.       Minuman Ringan

Ditimbang 5,0 gr sampel yang telah dihilangkan CO₂ nya dengan cara menuang-nuangkan ke dua buah becker glass secara bergantian sampai CO₂ hilang.

Dimasukkan dalam labu takar 500 ml ditambah aquadest sampai tanda batas, disaring.

A.     PK GULA Sebelum Inversi

1.       Dipipet seksama 10,0 ml hasil saringan sampel.

2.       Dimasukkan kedalam stop erlenmeyer / iodine flask.

3.      Ditambah 25,0 ml larutan Luff Shoorl dan batu didih, dihubungkan dengan pendingin udara.

4.      Dipanaskan sampai mendidih 10 menit.

5.      Didinginkan sampai betul-betul dingin, dalam keadaan pendingin udara masih menempel pada stop erlenmeyer.

6.      Ditambah 25 ml H₂SO₄ 6 N sedikit demi sedikit sambil digoyang.

7.      Ditambah 15 ml KI 20 % dengan hati-hati melalui dinding stop erlenmeyer.

8.      Dititrasi dengan Na₂S₂O₃ 0,1 N sampai warna kuning muda.

9.      Ditambah 5ml amylum 1 %.

10.   Dititrasi kembali sampai warna biru hilang.

11.    Dilakukan percobaan blanko dengan 25,0 aqudest.

 

B.     PK Gula Setelah Inversi

1.       Dipipet 25,0 ml hasil saringan sampel, dimasukkan labu takar 100 ml.

2.       Ditambah 3 tetes indicator MO 1 %.

3.      Ditambah beberapa tetes HCl 4 N sampai warna merah.

4.      Ditambah 15 ml HCl 0,1 N, di campur.

5.      Dipanaskan pada waterbath suhu 80°C selama 30 menit, didinginkan segera.

6.      Dinetralkan dengan NaOH 0,1 N tetes demi tetes sampai terbentuk warna jingga.

7.      Ditambah aquadest sampai ad 100 ml, dihomogenkan.

8.      Dipipet 25,0 ml larutan di atas dimasukkan dalam stop erlenmeyer.

9.      Ditambah batu didih, ditutup pendingin udara.

10.   Dipanaskan sampai mendidih 10 menit, didinginkan.

11.    Ditambah 25 ml H₂SO₄ 6 N sedikit demi sedikit sambil digoyang.

12.    Ditambah 15 ml KI 20 % dengan hati-hati melalui dinding stop erlenmeyer.

13.   Dititrasi dengan Na₂S₂O₃ 0,1 N sampai warna kuning muda.

14.   Ditambah 5ml amylum 1 %.

15.   Dititrasi kembali sampai warna biru hilang.

16.   Dilakukan percobaan blanko dengan 25,0 aqudest.

Perhitungan   :

-   Dihitung antara ml blanko dan ml sampel

    (B – S) x Na₂S₂O₃    = ……………. ml  Na₂S₂O_{3 0,1 N}

                        0,1

-   Dicari kadar mg glukosa dalam table

    =   mg table    x 100 % x Pengenceran

mg bahan

                                      = ………… %

DAFTAR KESETARAAN Na₂S₂O₃ 0,1 N

Dalam ml dengan GLUKOSA dalam mg

Na2S2O3 0,1 N	C12H22O11
1	2,3
2	4,8
3	7,2
4	9,7
5	12,2
6	14,7
7	17,2
8	19,8
9	22,4
10	25,0
11	27,6
12	30,3
13	33,0
14	35,7
15	38,5
16	41,3
17	44,2
18	47,1
19	50,0
20	53,0
21	56,0
22	59,1
23	62,2

PENETAPAN KADAR PROTEIN

Metode                 : Kjedahl

Bahan                    : Susu, Kecap

Prinsip                   :

-   Gugus amino dari asam amino pembentuk protein diuraikan oleh H₂SO₄ pekat dengan katalisator CuSO₄. Karbon dan hydrogen dioksidasi menjadi CO₂ dan H₂O. Sebagian H₂SO₄ tereduksi menjadi SO₂, dan senyawa terakhir inilah yang mereduksi gugus amino menjadi amoniak, yang dengan H₂SO₄ berlebihan membentuk NH₄HSO₄.

-   Dengan penambahan NaOH pekat berlebihan terbentuk amoniak dan ditangkap dalam HCl 0,1 N berlebihan.

-   Kelebihan HCl 0,1 N dititrasi kembali dengan NaOH 0,1 N.Miligram protein dihitung sebagai banyaknya mg Nitrogen dikalikan faktor protein. 

 Reaksi                    :

-   Pada saat Destruksi

               H

                |                            H₂SO₄

  R        - C -        COOH  → CO₂ + H₂O + NH₂ + SO₂

               |                             Cu⁺⁺

              NH₂

NH₂                     →                  NH₃

NH₄ + H₂SO₄   →  NH4HSO4

-   Pada saat Desilasi

NH4HSO4 + 2 NaOH →Na₂SO₄ + NH₃ + 2 H₂O

-   Pada saat Titrasi

NaOH + HCl    →NaCl + H₂O

Reagensia           :

-   H₂SO₄ pekat              

-   Campuran Na₂SO₄, CuSO₄, dan selen                       

-   NaOH 50%

-   HCl 0,1 N

-   Indikator campuran MB : MR ( 1 : 1 )

-   Indikator PP 0,1 %

-   H₃BO₃ 4 %                    

Prosedur              :

-  Ditimbang seksama 1,0 gr sampel dimasukkan dalam labu kjedahl jangan sampai menempel leher labu.

-   Ditambah 5,0 gram campuran katalisator + batu didih + 15 ml H₂SO₄ pekat.

-  Labu kjedahl diletakkan dalam kedudukan miring 45° diatas pemanas, ditutup dengan corong panaskan hati-hati dalam almari asam hingga buih habis, kemudian panaskan kuat-kuat

-  Hasil destruksi ditambah dengan 50 ml aquadest, kemudian pindahkan kedalam labu destilasi + 150 ml aquadest dingin + 3 tetes indicator PP 0,1%

-  Ditambah 50 ml NaOH 50% melalui dinding labu destilasi sampai merubah lakmus merah menjadi biru

-  Hasil destilasi ditampung dalam erlenmayer yang sudah dimasukkan H₃BO₃ 4% 50,0ml + 2 tetes indicator campuran

-   Destilasi sampai hasil destilasi ± 2 kali dari volume H₃BO₃ 4% (pH netral)

-   Destilasi dihentikan dan hasil destilasi yang semula berwarna hijau dititrasi dengan HCl 0,1N sampai warna biru kembali.

Perhitungan   : ml titrasi x N HCl x 0,014 x faktor protein x 100 %

                                                                gram sampel

                                 =………..%

PENETAPAN KADAR LEMAK

Metode              : Gravimetri dengan Soxhlet

Bahan                  : Susu

Prinsip                 : Lemak dalam makanan dipecah oleh HCl untuk membebaskan lemak dari selulose kemudian diekstraksi dengan dietyl eter.Kadar lemak ditetapkan secara gravimetri

Reaksi                 : -

Reagensia        : 

- HCl 4 N

- Dietyl eter

Prosedur           :

-          Ditimbang 1,0 gr sampel masukkan kedalam erlenmayer

-          Ditambah 25 ml HCl 4 N, ditutup kondensor, dipanaskan selama 15 menit sampai mendidih sambil diaduk

-          Disaring dengan kertas saring bebas lemak /whatman (refluksi)

-          Dicuci dengan air panas sampai hasil saringan menjadi netral ± pH 7

-          Kertas saring + lemak dikeringkan, lalu dilipat dan dibungkus dengan kertas saring bebas lemak yang baru dan diikat dengan benang kasur.

-          Dimasukkan dalam soxhlet + eter sampai volume 1½ kali

-          Diekstraksi selama 2-3 jam (6x putaran)

-          Lemak + eter sedikit mungkin lalu tuang dalam erlenmayer konstan

-          Diamkan sampai bau eter hilang

-          Dipanaskan dalam oven suhu 105°C selama 1 jam.

-          Dinginkan dalam eksikator selama 15 menit,lalu ditimbang

-          Ulangi pemanasan sampai diperoleh bobot konstan

Perhitungan   :                                Berat sari lemak x 100%

  Berat sampel

  = ………%